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El anillo piridina es capaz de atacar a electrófilos, de forma análoga al benceno, dando la reacción de sustitución electrófila aromática. Debido a la electronegatividad del nitrógeno, la piridina es mucho menos reactiva que el benceno en la SE, necesitando condiciones de reacción más drásticas.
Las posiciones favorecidas son la 3 y la 5, debido a la mayor estabilidad del intermedio de reacción.
La híbrido de resonancia que resulta de situar el electrófilo en posición 2,4 es menos favorable que el de la posición 3, debido a la presencia de una estructura canónica con nitrógeno positivo y sólo seis electrones.
No son viables las alquilaciones y acilaciones de Friedel-Crafts ya que los haluros de alquilo y acilo reaccionan sobre el nitrógeno.